Kaley Christine Cuoco,30 Kasım 1985'te Kaliforniya'da doğdu.. Babası İtalyan, annesi ise Alman ve İngiliz kökenlidir. 6 yaşından itibaren model ve ticari oyuncu olan Cuoco'nun ilk büyük rolü, Donald Sutherland ve Tim Matheson ile birlikte rol aldığı "Quicksand: No Escape" (1992) filmi ile oldu. Diğer televizyon işleri arasında, "küçük Ellen" karakteri ile konuk oyuncu olarak yer aldığı Ellen (1994), Northern Exposure (1990), Don't Forget Your Toothbrush (1995) ve My So-Called Life (1994) bulunur. Ayrıca, mini dizi Mr. Murder (1998) 'da rol alan Cuoco, Lucky 13 (2005), Picture Perfect (1997) ve Virtuosity (1995) filmlerinde de kamera önüne geçti. Oyunculuk kariyerinin yanı sıra tenis de oynayan Cuoco 2002-2005 yılları arasında "8 Simple Rules" adlı dizide Bridget Hennessy karakterini canlandırdı. Yakın dönemlerde ise "Charmed", "Prison Break", "The Big Bang Theory" gibi hit yapımların ardından The Flight Attendant (2022), The Man from Toronto (2022)ve Sevimli Rastlaşma (2022) adlı yapımlarda seyirciyle buluştu . Kaley Cuoco en son 2019-2023 arası sezonlarda "Harley Quinn" dizisinde başrol "Harley Quinn"e hayat vermiştir.